УТВЕРЖДАЮ

Главный государственный санитарный

врач Российской Федерации,

Первый заместитель Министра

здравоохранения Российской Федерации

Г.Г. Онищенко

29 июня 2003 г.

Дата введения: с момента утверждения

 

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение массовых концентраций 4-гидрокси-N, N-
диметил-4-(4-хлорфенил)-a, a-дифенил-1-
пиперидинбутанамида гидрохлорида (лоперамида
гидрохлорид) в воздухе рабочей зоны методом
высокоэффективной жидкостной хроматографии

Методические указания

 

МУК 4.1.1622-03

 

 

1. Область применения

Настоящие методические указания устанавливают количественный анализ воздуха рабочей зоны на содержание лоперамида гидрохлорида методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в диапазоне массовых концентраций 0,015 - 0,300 мг/м³.

2. Характеристика вещества

2.1. Структурная формула

2.2. Эмпирическая формула С₂₉Н₃₃СlN₂О₂ ∙ HCl.

2.3. Молекулярная масса 513,51.

2.4. Регистрационный номер САS 34552-83-5.

2.5. Физико-химические свойства.

Лоперамида гидрохлорид - белый или белый со слегка желтоватым оттенком кристаллический порошок с температурой плавления 225 °С (с разложением). Легкорастворим в метиловом, 95 %-м этиловом, изопропиловом спиртах и хлороформе, растворим в смеси ацетонитрил-дистиллированная вода, малорастворим в воде и разведенных кислотах.

Агрегатное состояние в воздухе - аэрозоль.

2.6. Токсикологическая характеристика.

Лоперамида гидрохлорид относится к группе опиоидных синтетических наркотических анальгетиков, производное фенилпиперидина, обладает антидиарейным действием, умеренно опасен при введении внутрь, умеренно токсичен при внутрибрюшинном введении, обладает общетоксическим и слабым местнораздражающим действием.

Ориентировочный безопасный уровень воздействия (ОБУВ) в воздухе рабочей зоны 0,03 мг/м³.

3. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений массовых концентраций лоперамида гидрохлорида с погрешностью, не превышающей ± 19 %, при доверительной вероятности 0,95.

4. Метод измерений

Измерения массовой концентрации лоперамида гидрохлорида выполняют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

Измерение проводят при длине волны 220 нм.

Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения содержания лоперамида гидрохлорида в хроматографируемом объеме раствора (20 мм³) - 0,05 мкг.

Нижний предел измерения массовой концентрации лоперамида гидрохлорида в воздухе - 0,015 мг/м³ (при отборе 833 дм³ воздуха).

Метод специфичен в условиях производства капсул лоперамида.

Определению не мешают крахмал, тальк, лактоза, магний стеариново-кислый.

5. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы

При выполнении измерений применяют следующие средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы.

5.1. Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы

Хроматограф жидкостный высокого давления фирмы Шимадзу SPD-MSA РНОТОDIODE ARRAV с УФ-детектором
Хроматографическая колонка размером 250´4 мм, заполненная сорбентом «СИЛАСОРБ CN» с размером частиц 7 мкм
Весы лабораторные ВЛА-200	ГОСТ 24104-88Е
Аспирационное устройство, ПУ-3Э/220 НПФ «НОРД-ЭКОЛОГИЯ ХИМАВТОМАТИКА»	ТУ ЕВКН 4.471.000
Фильтры АФА-ХА-20 с фильтродержателем	ТУ 52-01-367-80
Фильтры типа «Миллипор» или «Владипор», диаметр пор 0,45 мкм	ТУ 6-05-221-433-79
Фильтры бумажные обеззоленные «белая лента», диаметром 5,5 см	ТУ 6-09-1678-77
Колбы мерные, вместимостью 25, 50, 100, 500, 1000 см3	ГОСТ 1770-71Е
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5, 10 см3	ГОСТ 29227-91
Пробирки мерные с пришлифованными пробками, вместимостью 10 см3	ГОСТ 25336-82Е
Бюксы химические стеклянные с пришлифованными крышками, вместимостью 25 см3	ГОСТ 25336-82Е
Иономер универсального типа ЭВ-74 с погрешностью измерения не более 0,05 рН
Воронки химические, диаметром 30 мм	ГОСТ 25336-82Е
Секундомер	ГОСТ 5072-79
Палочки стеклянные	ГОСТ 25336-82Е
Цилиндры мерные, вместимостью 10, 250, 1000 см3	ГОСТ 1770-74Е
Баня ультразвуковая, фирмы «Шимадзу»
Лупа измерительная	ГОСТ 8309-75
Линейка измерительная металлическая	ГОСТ 427-75
Дистиллятор	ТУ 61-1-721-79

5.2. Реактивы

Лоперамид гидрохлорид, с содержанием основного вещества не менее 99,0 %, в пересчете на сухое вещество	НД 42-9953-99
Ацетонитрил, фирмы «Мерк» (ФРГ), для хроматографии
Кислота ортофосфорная, хч, плотность 1,87 г/см3	ГОСТ 6552-80
Вода дистиллированная	ГОСТ 6709-72

Допускается применение иных средств измерений, вспомогательных устройств, реактивов и материалов с техническими, метрологическими характеристиками и квалификацией, не хуже приведенных в данном разделе.

6. Требования безопасности

6.1. При работе с реактивами соблюдают требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005-88.

6.2. При проведении анализов горючих и вредных веществ должны соблюдаться меры противопожарной безопасности по ГОСТ 12.1.004-91.

6.3. При выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа высокого давления соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

7. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений и обработке их результатов допускаются лица с высшим или средним специальным образованием, прошедшие обучение и имеющие навыки работы на жидкостном хроматографе высокого давления.

8. Условия измерения

8.1. Процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях при температуре воздуха (20 ± 5) °С, атмосферном давлении 84 - 106 кПа и относительной влажности воздуха не более 80 %.

8.2. Выполнение измерений на жидкостном хроматографе высокого давления проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

9. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление растворов, растворителя и подвижной фазы, подготовка жидкостного хроматографа высокого давления, установление градуировочной характеристики, отбор проб.

9.1. Приготовление растворов

9.1.1. Основной стандартный раствор лоперамида гидрохлорида с концентрацией 500 мкг/см³ готовят растворением 0,0500 г вещества в смеси ацетонитрил-дистиллированная вода в соотношении (1:1) по объему в мерной колбе, вместимостью 100 см³. Раствор помещают на ультразвуковую баню на 15 мин, перемешивают и хранят в течение недели в холодильнике.

9.1.2. Стандартный раствор лоперамида гидрохлорида № 1 с концентрацией 100 мкг/см³ готовят разбавлением 10 см³ основного стандартного раствора смесью ацетонитрил-дистиллированная вода в соотношении (1:1) в мерной колбе, вместимостью 50 см³. Раствор применяют свежеприготовленным.

9.1.3. Стандартный раствор лоперамида гидрохлорида № 2 с концентрацией 25 мкг/см³ готовят разбавлением 25 см³ стандартного раствора № 1 смесью ацетонитрил-дистиллированная вода в соотношении (1:1) в мерной колбе, вместимостью 100 см³. Раствор применяют свежеприготовленным.

9.1.4. Растворитель: помещают 500 см³ ацетонитрила в мерную колбу, вместимостью 1000 см³, доводят объём раствора дистиллированной водой до 1000 см³, перемешивают, пропускают через фильтр типа «Миллипор» или «Владипор» и дегазируют.

9.1.5. Элюент: помещают 500 см³ ацетонитрила в колбу, вместимостью 1000 см³, доводят объём раствора дистиллированной водой до 1000 см³, добавляют 1 см³ ортофосфорной кислоты, перемешивают, пропускают через фильтр типа «Миллипор» или «Владипор» и дегазируют.

9.2. Подготовка прибора

Подготовку жидкостного хроматографа высокого давления проводят в соответствии с руководством по его эксплуатации.

9.3. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику, выражающую зависимость площади пика (в приборных единицах) от массы лоперамида гидрохлорида в хроматографируемом объеме раствора, устанавливают по методу абсолютной калибровки с использованием 6 серий градуировочных растворов из 5 параллельных определений для каждой серии согласно табл. 1.

Растворы применяют свежеприготовленными.

Таблица 1

Растворы для установления градуировочной характеристики при определении лоперамида гидрохлорида

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых растворов проб:

температура термостата колонки 40 °С;

скорость подачи элюента 2 см³/мин;

чувствительность измерения детектора 0,02 - 0,1 АВS;

длина волны УФ-детектора 220 нм;

скорость движения диаграммной ленты 4,25 мм/мин;

максимальный объем вводимой пробы 20 мм³;

время удерживания лоперамида гидрохлорида 7 мин 14 с;

эффективность колонки не менее 600 т.т.

Проверку градуировочного графика проводят не реже 1 раза в месяц или в случае использования новой партии реактивов или после ремонта прибора.

9.4. Отбор пробы воздуха

Воздух с объёмным расходом 100 дм³/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-20, помещенный в фильтродержатель. Для измерения ¹/₂ ОБУВ лоперамида гидрохлорида следует отобрать 833 дм³ воздуха. Отобранные пробы могут храниться в течение трех суток в бюксах с пришлифованными крышками.

10. Выполнение измерения

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический бюкс с пришлифованной крышкой вместимостью 25 см³, приливают 5 см³ смеси ацетонитрил-дистиллированная вода в соотношении (1:1), помещают в ультразвуковую баню и оставляют на 15 мин. Затем раствор перемешивают, фильтр тщательно отжимают стеклянной палочкой и удаляют. Раствор фильтруют на химической воронке через бумажный фильтр «белая лента» в мерную пробирку, вместимостью 10 см³, доводят смесью ацетонитрил-дистиллированная вода до 5 см³ и помещают в ультразвуковую баню на 5 мин. Степень десорбции вещества с фильтра 98 %.

Хроматографирование анализируемых растворов проб проводят в тех же условиях, что и при построении градуировочной характеристики.

Количественное определение содержания лоперамида гидрохлорида (мкг) в хроматографируемом объеме раствора пробы проводят по предварительно построенному градуировочному графику.

Примечание. Анализируемый раствор фильтруют для удаления нерастворимых в смеси ацетонитрил-дистиллированная вода вспомогательных веществ, присутствующих в капсулах лоперамида гидрохлорида.

11. Вычисление результатов измерений

Массовую концентрацию лоперамида гидрохлорида (С, мг/м³) в воздухе вычисляют по формуле:

 где

а - количество вещества, найденное в анализируемом объеме раствора пробы по градуировочному графику, мкг;

б - хроматографируемый объем раствора пробы, взятый для анализа, см³;

в - общий объем анализируемого раствора, см³;

V - объём воздуха, отобранного для анализа (дм³) и приведенного к стандартным условиям (см. прилож. 1).

12. Оформление результатов анализа

Результат количественного анализа представляют в виде (С ± D) мг/м³, Р = 0,95. Значение D = 0,00084 + 0,19С (мг/м³), где D - характеристика погрешности.

13. Контроль погрешности методики КХА

Значения характеристики погрешности, норматива оперативного контроля погрешности и норматива оперативного контроля воспроизводимости приведены в табл. 2.

Таблица 2

Метрологические характеристики приведены в виде зависимости от значения массовой концентрации анализируемого компонента в пробе - С.

13.1. Оперативный контроль погрешности

Оперативный контроль погрешности выполняют в одной серии с КХА рабочих проб.

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны. Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике. После отбора пробы экстракт с фильтра делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики и получают результат анализа исходной рабочей пробы - С₁. Вторую часть разбавляют соответствующим растворителем в два раза и снова делят на две равные части, первую из которых анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, - С₂. Во вторую часть делают добавку анализируемого компонента (X) до массовой концентрации исходной рабочей пробы (С₁) (общая концентрация не должна превышать верхнюю границу диапазона измерения) и анализируют в точном соответствии с прописью методики, получая результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой - С₃. Результаты анализа исходной рабочей пробы - С₁, рабочей пробы, разбавленной в два раза - С₂, и рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой - С₃, получают по возможности в одинаковых условиях, т.е. их получает один аналитик с использованием одного набора мерной посуды, одной партии реактивов и т.д.

Решение об удовлетворительной погрешности принимают при выполнении условия:

 где

С₁ - результат анализа рабочей пробы;

С₂ - результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза;

С₃ - результат анализа рабочей пробы, разбавленной в два раза, с добавкой анализируемого компонента;

Х - величина добавки анализируемого компонента;

K - норматив оперативного контроля погрешности.

K = 0,00117 + 0,21С (мг/м³)

13.2. Оперативный контроль воспроизводимости

Образцами для контроля являются реальные пробы воздуха рабочей зоны.

Объем отобранной для контроля пробы должен соответствовать удвоенному объему, необходимому для проведения анализа по методике. После отбора пробы экстракт с фильтра делят на две равные части и анализируют в точном соответствии с прописью методики, максимально варьируя условия проведения анализа, т.е. получают два результата анализа в разных лабораториях или в одной, используя при этом разные наборы мерной посуды, разные партии реактивов. Два результата анализа не должны отличаться друг от друга на величину допускаемых расхождений между результатами анализа:

 где

С₁ - результат анализа рабочей пробы;

С₂ - результат анализа этой же пробы, полученной в другой лаборатории или в этой же, но другим аналитиком с использованием другого набора мерной посуды и другой партии реактивов;

D - допустимые расхождения между результатами анализа одной и той же пробы.

D = 0,0033 + 0,32С (мг/м³)

При превышении норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении указанного норматива D выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля и устраняют их.

14. Нормы затрат времени на анализ

Для проведения серии анализов из 6 проб требуется 5 ч.

Методические указания разработаны Государственным унитарным предприятием «Всероссийский научный центр по безопасности биологически активных веществ» (В.П. Жестков, А.П. Крымов, В.Ф. Алещенко, Л.И. Крымова).

Приложение 1

Приведение объема воздуха к стандартным условиям

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 101,33 кПа) проводят по формуле:

, где

V_t - объем воздуха, отобранного для анализа, дм³;

Р - барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);

t - температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V₂₀ следует пользоваться таблицей коэффициентов (прилож. 2). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить V_t на соответствующий коэффициент.

Приложение 2

Коэффициенты для приведения объема воздуха к стандартным условиям

Приложение 3

Указатель основных синонимов, технических, торговых и фирменных названий веществ

1. Амиодарон

2. Амоксициллина тригидрат

3. Ацикловир

4. Витамин А

5. Галоперидол

6. Ксиланаза

7. Лоперамида гидрохлорид

8. Мексидол

9. Мексикор

10. Офлоксацин

11. Пиразинамид

12. Ретинола ацетат

13. Родопол-23

14. Симвастатин

15. Трамадол

16. Хладон-23

17. Хладон-31-10

18. Хладон-116

19. Хладон-122

20. Хладон-R11511

21. Цианборгидрид натрия

22. Этамбутола дигидрохлорид

Приложение 4

Вещества, определяемые по ранее утвержденным методическим указаниям

 

СОДЕРЖАНИЕ