4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ
В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ, СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОМ
СЫРЬЕ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

Измерение массовой концентрации Тетраконазола
методом газожидкостной хроматографии
в воздухе рабочей зоны

СБОРНИК МЕТОДИЧЕСКИХ УКАЗАНИЙ
МУК 4.1.1165-02

ВЫПУСК 1

МОСКВА
2004

1. Сборник подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); Всероссийским НИИ фитопатологии (А.М. Макеев и др.); Всероссийским НИИ защиты растений (В.И. Долженко и др.); Санкт-Петербургским НИИ лесного хозяйства (Маслаков С.Е., Л.В. Григорьева и др.), при участии Департамента Госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов).

2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России.

3. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.

4. Введены впервые.

УТВЕРЖДАЮ

Главный государственный санитарный

врач Российской Федерации, Первый

заместитель Министра здравоохранения

Российской Федерации

Г.Г. Онищенко

Дата введения: 1 января 2003 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение массовой концентрации Тетраконазола
методом газожидкостной хроматографии
в воздухе рабочей зоны

Настоящие методические указания устанавливают методику количественного химического анализа воздуха рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии для определения в нем массовой концентрации тетраконазола в диапазоне 0,1 - 1,0 мг/м³.

Тетраконазол - действующее вещество препарата ЭМИНЕНТ, ВЭ (125 г/л), фирма-производитель ТОМЕН КОРПОРЕЙШН, Япония.

(RS)-2-(2,4-дихлорфенил)-3-(1Н-1,2,4-триазол-1-ил)-1-(1,1,2,2-тетрафторэтокси)-пропан (IUPAC).

C₁₃H₁₁Cl₂F₄N₃O                                                                                                 M. м. 372,1

Бесцветная вязкая жидкость, не имеет запаха. Разлагается при 235 - 240 °С до кипения. Давление паров при 20 °С: 1,4 × 10^-6 мм рт. ст. Плотность - 1,459 г/см³ (20 °С). Растворимость в органических растворителях при 20 °С (вес. %): метанол - более 52; этиловый спирт - 46,7; этилацетат - 42,2; 1,2-дихлорэтан - 41,7; ацетон - 40,3; ксилол - 29,9; гексан - 2,4. Растворимость в воде при 20 °С (мг/дм³): 189,8. Коэффициент распределения н-октанол-вода log K_ow 3,56 при 20 °С.

Может присутствовать в воздухе рабочей зоны в виде аэрозоля.

Краткая токсикологическая характеристика

Острая пероральная токсичность (LD₅₀) для крыс (самцы) - 1248 мг/кг; острая дермальная токсичность (LD₅₀) для крыс - более 2000 мг/кг; острая ингаляционная токсичность (LK₅₀) для крыс - более 3660 мг/м³.

Область применения препарата

Тетраконазол - системный фунгицид, рекомендуемый для борьбы с широким спектром болезней озимых и яровых зерновых культур.

ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 0,6 мг/м³.

1. Погрешность измерений

Методика обеспечивает выполнение измерений с погрешностью, не превышающей ± 22 %, при доверительной вероятности 0,95.

2. Метод измерения

Измерения концентраций тетраконазола выполняют методом газожидкостной хроматографии (ГЖХ) с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов (ДПР).

Концентрирование тетраконазола из воздуха осуществляют на бумажные фильтры «синяя лента».

Нижний предел измерения в хроматографируемом объеме пробы - 0,1 нг.

Определению не мешают компоненты препаративной формы.

3. Средства измерений, вспомогательные устройства, реактивы и материалы

3.1. Средства измерений

Газовый хроматограф «Цвет», снабженный детектором постоянной скорости рекомбинации ионов (ДПР) с пределом детектирования по линдану 4 × 10-14 г/см3 или другой с аналогичными или улучшенными характеристиками	ТУ 2.722.150
Микрошприцы типа МШ-1, вместимостью 1 мкл	ТУ 5Е2-833-024
Аспирационное устройство ЭА-1	ТУ 25-11-1414-78
Барометр-анероид М-67	ТУ 2504-1797-75
Весы аналитические ВЛА-200	ГОСТ 24104-80Е
Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена деления 1 °С, пределы измерения 0 - 55 °С	ТУ 215-73Е
Мерные колбы, вместимостью 50 и 100 см3	ГОСТ 1770-74Е
Пипетки, вместимостью 1, 2, 5 и 10 см3	ГОСТ 20292-74Е

Допускается использование средств измерения с аналогичными или лучшими характеристиками.

3.2. Реактивы

Тетраконазол с содержанием д. в. 99,37 % (Томен Корпорейшн, Япония)
Азот, осч, из баллона	ГОСТ 9293-79
Ацетон, ч	ГОСТ 2603-79
н-гексан, хч	ТУ 6-09-4521-77
Хроматон Супер с 5 % SE-30 (0,2 - 0,25 мм), Хемапол, Чехия
Хроматон NAW-DMCS с 5 % OV-210 (0,12 - 0,16 мм), Хемапол, Чехия
Этиловый спирт	ГОСТ 5964-67

3.3. Вспомогательные устройства

Бумажные фильтры «синяя лента», обеззоленные, предварительно промытые ацетоном или этанолом	ТУ 6-09-2678-77
Воронки химические, конусные, диаметром 340 мм	ГОСТ 25336-82Е
Груша резиновая
Колбы грушевидные со шлифом, вместимостью 100 мл	ГОСТ 10394-72
Насос водоструйный	ГОСТ 25336-82Е
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или ротационный вакуумный испаритель В-169 фирмы Buchi, Швейцария	ТУ 25-11-917-76
Стаканы химические, вместимостью 100 мл	ГОСТ 25336-82Е
Стеклянные палочки
Фильтродержатели пластмассовые, диаметром 18 - 20 мм
Хроматографическая колонка стеклянная, длиной 2 м, внутренним диаметром 3 мм

Допускается применение другого оборудования и хроматографических колонок с аналогичными техническими характеристиками.

4. Требования безопасности

4.1. При работе с реактивами соблюдать требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими, лекговоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1005-88.

4.2. При выполнении измерений с использованием газового хроматографа соблюдают правила электробезопасности в соответствии с ГОСТ 12.1.019-79 и инструкцией по эксплуатации прибора.

5. Требования к квалификации операторов

К выполнению измерений допускают лиц, имеющих квалификацию не ниже инженера-химика, с опытом работы на газовом хроматографе.

6. Условия измерений

При выполнении измерений соблюдают следующие условия:

·          процессы приготовления растворов и подготовки проб к анализу проводят в нормальных условиях согласно ГОСТ 15150-69 при температуре воздуха (20 ± 10) °С, атмосферном давлении 630 - 800 мм рт. ст. и влажности не более 80 %.

·          выполнение измерений на газовом хроматографе проводят в условиях, рекомендованных технической документацией к прибору.

7. Подготовка к выполнению измерений

Перед выполнением измерений проводят следующие работы: приготовление стандартных растворов, подготовку хроматографической колонки и установление градуировочной характеристики, отбор проб.

7.1. Приготовление стандартных растворов

7.1.1. Исходный раствор тетраконазола для градуировки (концентрация 100 мкг/см³)

В мерную колбу вместимостью 100 см³ помещают 0,0100 г тетраконазола, растворяют в 50 - 70 см³ ацетона, доводят ацетоном до метки, тщательно перемешивают. Раствор хранится в холодильнике в течение 3 месяцев.

7.1.2. Раствор № 1 тетраконазола для градуировки (концентрация 10 мкг/см³)

В мерную колбу вместимостью 50 см³ помещают 5 см³ исходного стандартного раствора тетраконазола (п. 7.1.1) с концентрацией 100 мкг/см³, разбавляют ацетоном до метки. Раствор хранится в холодильнике в течение 1 месяца.

7.1.3. Рабочие растворы №№ 2 - 6 для градуировки (концентрация 0,1 - 1,0 мкг/см³)

В 5 мерных колб вместимостью 100 см³ вносят по 1,0; 2,5; 5,0; 7,0 и 10 см³ стандартного раствора № 1 (п. 7.1.2) с концентрацией 10 мкг/см³, доводят объем до метки ацетоном. Получают растворы №№ 2 - 6 с концентрациями 0,1; 0,25; 0,5; 0,7 и 1,0 мкг/см³. Растворы хранятся в холодильнике в течение 1 месяца.

7.2. Отбор проб

Отбор проб воздуха проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны». В течение 15 минут последовательно отбирают 3 пробы, для чего воздух с объемным расходом 1 - 2 дм³/мин аспирируют в течение 5 минут через фильтр «синяя лента», помещенный в фильтродержатель.

Для измерения концентрации тетраконазола на уровне 0,5 ОБУВ воздуха рабочей зоны необходимо отобрать 2 дм³ воздуха.

Срок хранения в холодильной камере при 4 °С отобранных проб, помещенных в полиэтиленовые пакеты - 14 дней.

7.3. Подготовка и кондиционирование хроматографической колонки

Готовую насадку (5 % SE-30 на Хроматоне Супер, 0,20 - 0,25 мм или 5 % OV-210 на Хроматоне NAW-DMCS, 0,12 - 0,16 мм) засыпают в стеклянную колонку длиной 2 м, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 260 °С в течение 10 - 12 часов.

7.4. Установление градуировочной характеристики

Градуировочную характеристику устанавливают методом абсолютной градуировки на градуировочных растворах тетраконазола. Она выражает зависимость высоты пика (мм) от концентрации тетраконазола в растворе (мкг/см³) и строится с использованием 5 стандартных растворов №№ 2 - 6, приготовленных по п. 7.1.3. В испаритель прибора вводят по 1 мм³ данных градуировочных растворов и анализируют в условиях хроматографирования по п. 7.4.1.

7.4.1. Условия хроматографирования

Хроматограф газовый «Цвет 500М» с детектором постоянной скорости рекомбинации ионов

7.4.1.1. Хроматографическая колонка длиной 2 м, внутренним диаметром 3 мм, заполненная 5 % SE-30 на Хроматоне Супер (0,20 - 0,25 мм)

Температура термостата колонки                                                   240 °С

детектора                                                                                           300 °С

испарителя                                                                                         250 °С

Скорость газа-носителя (азота)                                                       50 ± 1 мл/мин

Рабочая шкала электрометра                                                           64 × 10¹⁰ Ом

Скорость движения ленты самописца                                            200 мм/ч

Объем вводимой пробы                                                                    1 мм³

Время удерживания тетраконазола                                                 115 ± 2 с

Линейный диапазон детектирования                                             0,1 - 1,0 нг

7.4.1.2. Альтернативная колонка

Хроматографическая колонка длиной 2 м, внутренним диаметром 3 мм, заполненная 5 % OV-210 на Хроматоне NAW-DMCS (0,12 - 0,16 мм),

Температура термостата колонки                                                   205 °С

детектора                                                                                           300 °С

испарителя                                                                                         250 °С

Скорость газа-носителя (азота)                                                       27 ± 1 мл/мин

Рабочая шкала электрометра                                                           64 × 10¹⁰ Ом

Скорость движения ленты самописца                                            240 мм/ч

Объем вводимой пробы                                                                    1 мм³

Время удерживания тетраконазола                                                 100 ± 2 с

Линейный диапазон детектирования                                             0,1 - 1,0 нг

Градуировочную характеристику проверяют ежедневно по 1 - 2 стандартным растворам различной концентрации. Если получаемые результаты отличаются более чем на ± 11 % от данных, заложенных в градуировочную характеристику, ее строят заново, используя свежеприготовленные рабочие стандартные растворы.

8. Выполнение измерений

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 см³, заливают 10 см³ ацетона, оставляют на 10 минут, периодически перемешивая. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 10 см³.

Объединенный экстракт упаривают в грушевидной колбе на ротационном вакуумном испарителе при температуре бани 40 - 45 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают потоком теплого воздуха. Сухой остаток растворяют в 5 см³ гексана, хроматографируют в условиях, указанных в пп. 7.4.1.1 или 7.4.1.2.

Пробу вводят в инжектор хроматографа не менее двух раз. Измеряют высоты пиков на хроматограмме с точностью до 0,5 мм.

Перед анализом опытной пробы проводят хроматографирование холостой (контрольной) пробы - экстракта неэкспонированного фильтра.

Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 1,0 мкг/мл разбавляют гексаном.

9. Обработка результатов измерений

Массовую концентрацию тетраконазола в пробе воздуха, X, мг/м³ рассчитывают по формуле:

, где

Х - содержание тетраконазола в пробе воздуха, мг/м³;

С - концентрация тетраконазола в хроматографируемом растворе, установленная по градуировочной характеристике, мкг/см³;

W - объем экстракта, подготовленного для хроматографирования, см³;

V₂₀ - объем пробы воздуха, отобранного для анализа, приведенного к стандартным условиям (давление 760 мм рт. ст., температура 20 °С), дм³.

, где

Т - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), °С;

Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт. ст.;

u - расход воздуха при отборе пробы, дм³/мин,

t - длительность отбора пробы, мин.

Если пробоотборное устройство фиксирует объем воздуха (V, дм³), в вышеприведенной формуле произведение ut заменяется на V.

10. Оформление результатов измерений

Результат количественного анализа в документах, предусматривающих его использование, представляют в виде:

·      результат анализа  (мг/м³), характеристика погрешности δ, %, P = 0,95 или , мг/м³, Р = 0,95, где

, мг/м³

За результат анализа () принимается среднее арифметическое результатов параллельных определений X₁ и Х₂ ( = (X₁, + Х₂)/2), расхождение между которыми не превосходит значений норматива оперативного контроля сходимости d, равного 21 %.

Результат измерений должен иметь тот же десятичный разряд, что и погрешность.

11. Контроль погрешности измерений

11.1. Контроль воспроизводимости измерений

Образцами для контроля служат градуировочные стандартные растворы №№ 2 - 6 тетраконазола. Процедура контроля состоит в приготовлении растворов по п. 7.1.3, определении содержания тетраконазола в образце по п. 7.4.1.

Проводят анализ 2 объемов градуировочного раствора, максимально варьируя условия проведения анализа, т.е. получают два результата анализа, используя разные наборы мерной посуды, партии реактивов. В работе участвуют два аналитика. Результаты анализа должны удовлетворять условию:

, где

X₁ и Х₂ - результаты двух определений концентрации тетраконазола в условиях воспроизводимости, мкг/см³;

 - среднее арифметическое X₁ и Х₂, мкг/см³;

D - норматив оперативного контроля воспроизводимости измерений, равный 22 %.

При превышении норматива оперативного контроля воспроизводимости эксперимент повторяют. При повторном превышении норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля и устраняют их.

11.2. Контроль погрешности измерений

Для контроля погрешности измерений используют те же образцы, что и для контроля воспроизводимости. Измерения считают соответствующими нормативу оперативного контроля погрешности, если выполняется условие:

, где

К - норматив оперативного контроля погрешности, равный 22 %;

Х - результат определения концентрации тетраконазола, мкг/см³;

Х_т - содержание тетраконазола в контрольном растворе, мкг/см³.

При превышении норматива оперативного контроля погрешности эксперимент повторяют. При повторном превышении норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам контроля и устраняют их.

12. Разработчики

Ракитский В.Н., член-корр. РАМН, проф., Юдина Т.В., Мошлакова Л.А., Волчек С.И., Волкова В.Н. (Федеральный научный центр гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана, г. Мытищи Московской обл.).

СОДЕРЖАНИЕ