4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ПЕСТИЦИДОВ
В ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТАХ, СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННОМ
СЫРЬЕ И ОБЪЕКТАХ ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ

Измерение концентраций Цимоксанила в воздухе
рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии

СБОРНИК МЕТОДИЧЕСКИХ УКАЗАНИЙ
МУК 4.1.1150-02

ВЫПУСК 1

МОСКВА
2004

1. Сборник подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к. хим. н. Довгилевич А.В.); Всероссийским НИИ фитопатологии (А.М. Макеев и др.); Всероссийским НИИ защиты растений (В.И. Долженко и др.); Санкт-Петербургским НИИ лесного хозяйства (Маслаков С.Е., Л.В. Григорьева и др.), при участии Департамента Госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов).

2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию при Минздраве России.

3. Утверждены и введены в действие Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко.

4. Введены впервые.

УТВЕРЖДАЮ

Главный государственный санитарный

врач Российской Федерации, Первый

заместитель Министра здравоохранения

Российской Федерации

Г.Г. Онищенко

Дата введения: 1 января 2003 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций Цимоксанила в воздухе
рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии

1. Вводная часть

Фирма-производитель: Дюпон, США.

Торговое название: Курзат, Танос.

Название действующего вещества по ИСО: Цимоксанил.

Название действующего вещества по IUPAC: 1-(2-циано-2-мето-ксииминоацетил)-3-этилмочевина.

C₇H₁₀N₄O₃                                                                                                          M. м. 198,2

Химически чистый Цимоксанил представляет собой бесцветное кристаллическое вещество.

Давление паров: 0,15 мПа при 20 °С.

Температура плавления: 160 - 161 °С.

Коэффициент распределения н-октанол - вода logP: 0,59 (рН 5); 0,67 (рН 7).

Растворимость в воде составляет 890 мг/л. Растворимость в органических растворителях (г/л): ацетон - 62,4; ацетонитрил - 57, бензол - 2; гексан - 1,85, диметилформамид - 185, метанол - 22,9, метилен хлорид - 133, н-октанол - 1,43; толуол - 5,29, хлороформ - 103, этилацетат - 28.

Цимоксанил стабилен в интервале рН 2 - 5, в щелочных растворах быстро гидролизуется (ДТ₅₀ - 149 дн. при рН 5, 34 ч при рН 7 и 31 мин при рН 9). В воде водоемов период полураспада составляет 1,8 дней.

В почве Цимоксанил быстро разрушается под действием микроорганизмов. В тепличных условиях период полураспада составляет около трех дней, в полевых условиях от 7 до 14 дней. Миграция по почвенному профилю слабая.

В растениях соединение быстро разрушается до нетоксичных метаболитов. Остатки Цимоксанила в клубнях картофеля не обнаруживаются. В ягодах винограда, по данным фирмы Дюпон, остатки составляли ниже 0,2 мг/кг при обработке за несколько дней до уборки.

Краткая гигиеническая характеристика

Цимоксанил относится к умеренно опасным соединениям по острой (ЛД₅₀ для крыс - 960 мг/кг), малоопасным по дермальной токсичности (ЛД₅₀ для крыс - более 2000 мг/кг) и умеренно опасным по ингаляционной (ЛК₅₀ (4 часа) - 5060 мг/м³) токсичности, не вызывает раздражения глаз и слабо раздражает кожу.

В РФ установлены следующие гигиенические нормативы:

ОБУВ в воздухе рабочей зоны - 1,0 мг/м³;

ОБУВ в атмосферном воздухе при применении - 0,003 мг/м³;

Цимоксанил - контактный фунгицид с местным системным эффектом, обладающий защитным и лечащим действием. Высокоактивен против грибов, вызывающих фитофтороз и пероноспороз, не действует на возбудителей настоящей мучнистой росы. Длительность защитного действия составляет 4 - 6 дней, поэтому рекомендуется его использование в смеси с другими фунгицидами системного и защитного контактного действия.

Зарегистрирован в России под названием Танос (DPX-KP 481), диспергируемые в воде гранулы, 50 % (25 % Фамоксадона + 25 % Цимоксанила) на картофеле с нормой расхода 0,6 кг/га, трехкратная обработка за сезон.

2. Методика определения остаточных количеств Цимоксанила в воздухе рабочей зоны

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Метод основан на хроматографическом выделении Цимоксанила в тонком слое сорбента с последующим проявлением хроматограмм после хлорирования, о-толидиновым реагентом.

Отбор проб осуществляется концентрированием на фильтрах АФА-ХА-20. Количественное определение проводится методом визуального сравнения величин пятен стандарта и пробы.

2.1.2. Избирательность метода

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы, а также пестицидов, применяемых в интенсивной технологии выращивания овощных культур, картофеля и винограда (хлор- и фосфорорганические пестициды, пиретроиды, триазолы и дитиокарбаматы).

2.1.3. Метрологическая характеристика метода (Р = 0,95)

Число параллельных определений - 6.

Предел обнаружения Цимоксанила в хроматографическом объеме - 0,6 нг.

Предел обнаружения в пробе воздуха - 0,05 мг/м³ (при отборе 200 л воздуха).

Диапазон определяемых концентраций - 0,05 - 0,3 мг/м³.

Среднее значение определения - 91,8 %.

Стандартное отклонение (S) - 2,63 %.

Относительное стандартное отклонение (DS) - 1,07 %.

Доверительный интервал среднего - 2,75 %

Суммарная погрешность измерения ± 25 %.

Низший предел измерения Цимоксанила 0,2 мкг в хроматографируемой пробе.

Время выполнения измерения, включая отбор пробы воздуха, около одного часа.

2.2. Реактивы, растворы, материалы и оборудование

2.2.1. Реактивы, материалы и растворы

Ацетон, чда	ГОСТ 2603-79
Гексан, чда	ТУ 6-09-3375-78
Калия иодид, ч	ГОСТ 4232-74
Калия перманганат, ч	ГОСТ 20490-75
Кислота уксусная ледяная, ч	ГОСТ 18270-72
Кислота хлороводородная, концентрированная, ч	ГОСТ 3118-77
Спирт этиловый, ректиф., 96 %	ГОСТ 5963-67
о-Толидин, ч	ТУ 6-09-2232-75
Хлороформ, чда	ГОСТ 20015-74
Цимоксанил с содержанием д. в. 99,4%

2.3. Приборы и оборудование

Бюксы с крышкой, вместимость 30 мл	ГОСТ 25336-82
Испаритель ротационный вакуумный, ИР-1М	ТУ 25-11-917-76
или аналогичный с набором колб	ГОСТ 9737-70
Камера хроматографическая с пришлифованной крышкой или аналогичная	ГОСТ 25336-82
Колбы мерные, вместимостью 100 мл	ГОСТ 1770-74Е
Лампа УФ света, медицинская или аналогичная	МНУ 42-1618-61
Микропипетки на 0,1 мл	ГОСТ 20292-74
Микрошприц на 100 мкл или аналогичный	ГОСТ 20292-74
Пипетки с делениями на 10 и 1 мл	ГОСТ 20292-74
Пластинки хроматографические Силуфол 254, Хемапол, Чехия
Пробирки градуированные на шлифах, вместимостью 10 мл	ГОСТ 1770-74
Пульверизаторы стеклянные	ГОСТ 25336-82
Устройство аспирационное или аналогичное	ТУ 64-1862-77
Фильтродержатель
Фильтры АФА-ХА-20
Чашки Петри	ГОСТ 25336-82
Эксикатор	ГОСТ 25336-82

2.4. Отбор проб

Воздух с объемным расходом 10 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ХА-20, помещенный в фильтродержатель. Для измерения 0,5 ОБУВ следует отобрать 200 л воздуха. Срок хранения отобранных проб не более 7 дней.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1. Приготовление стандартных растворов

Стандартный раствор № 1 готовят растворением 10 мг Цимоксанила в ацетоне в мерной колбе вместимостью 100 мл. Для приготовления стандартного раствора № 2 из раствора № 1 пипеткой отбирают 10 мл, переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят до метки гексаном. Стандартные растворы №№ 1 и 2 стабильны при хранении в холодильнике в течение 6 месяцев.

2.5.2. Приготовление проявляющего реагента

Растворяют 0,16 г о-толидина в 30 мл ледяной уксусной кислоты, доводят до 500 мл дистиллированной водой и прибавляют 1 г иодида калия. Раствор хранят в темной склянке.

2.5.3. Подготовка хроматографической камеры

Хроматографическую камеру за один час до начала хроматографирования заполняют смесью подвижных растворителей гексан-ацетон (3 : 2) или хлороформом. Объем подвижного растворителя в камере должен по высоте находиться не выше, чем на 0,7 - 1,0 см от уровня дна камеры.

2.5.4. Подготовка камеры для хлорирования

Камеру для хлорирования готовят следующим образом: на дно эксикатора помещают чашку Петри с 5 г перманганата калия, а затем к ее содержимому осторожно приливают 15 мл концентрированной соляной кислоты. Эксикатор закрывают пришлифованной крышкой. Камера может быть использована через 5 - 10 мин.

2.6. Описание определения

Фильтр из патрона с помощью пинцета и стеклянной палочки переносится в стеклянный бюкс вместимостью 30 мл и заливают 10 мл этилового спирта. Фильтр несколько раз отжимают стеклянной палочкой в растворителе, а затем растворитель переносят в грушевидную колбу вместимостью 50 мл, отжимая капли растворителя с фильтра стеклянной палочкой. Эту процедуру повторяют еще два раза. Из объединенного спиртового раствора с помощью ротационного вакуумного испарителя полностью отгоняют растворитель. К сухому остатку пипеткой добавляют 5 мл гексана. Колбочку закрывают пробкой на шлифе и ее стенки тщательно обмывают растворителем. Аликвотную часть раствора (100 мкг) с помощью микрошприца на 100 мкл или микропипетки на 0,1 мл наносят на хроматографическую пластинку Силуфол 254. Справа и слева таким же образом наносят серию градуировочных растворов Цимоксанила с содержанием 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 1,0 мкг. Градуировочные растворы готовят в мерных пробирках с пробками на шлифе вместимостью 10 мл, согласно табл. 1.

Таблица

Шкала стандартов

Хроматограммы развивают в системе гексан-ацетон (3 : 2) или в хлороформе. После развития хроматограммы высушенную пластинку помещают под Уф лампу на 10 мин, а затем на 10 мин в свежеприготовленную хлорирующую камеру. После удаления избытка хлора пластинку обрабатывают из пульверизатора проявляющим реактивом. Цимоксанил проявляется на хроматограммах темными пятнами на белом фоне с R_f 0,66 ± 0,02 в первой системе подвижных растворителей и 0,21 ± 0,05 в хлороформе. Линейный диапазон определения 0,2 - 1,0 мкг. Пятна стабильны в течение 5 - 8 мин.

Количественное измерение содержания Цимоксанила в пробе проводят путем сравнения интенсивности окраски и площади пятен пробы и того стандарта, площадь и интенсивность окраски которого наиболее близка площади и интенсивности окраски рабочей пробы.

2.7. Обработка результатов анализа и расчет концентрации

Концентрацию Цимоксанила в воздухе С (мг/м³) вычисляют по формуле:

, где

А - содержание Цимоксанила, найденное в хроматографируемой пробе, мкг;

V - общий объем экстракта пробы, мл;

V₁ - объем пробы, взятой для хроматографирования, мл;

V₀ - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л.

Примечание. Для расширения диапазона измерения концентрации Цимоксанила в воздухе, при его большой концентрации, можно в грушевидную колбочку пипеткой добавлять большее, замеренное количество гексана или, наоборот, после концентрирования, добавлять в грушевидную колбочку пипеткой меньшее количество гексана.

3. Требования техники безопасности

Помещение, в котором проводится определение Цимоксанила, обязательно должно быть оборудовано приточно-вытяжной вентиляцией.

Работу с образцами, стандартами и растворителями следует проводить в вытяжном шкафу с использованием индивидуальных средств защиты.

Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями, токсичными веществами, электронагревательными приборами и сжатыми газами.

4. Разработчики

Ф.Р. Мельцер, К.Ф. Новикова, НИИХСЗР, г. Москва.

СОДЕРЖАНИЕ