4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Определение остаточных количеств
пестицидов в пищевых продуктах,
сельскохозяйственном сырье и
объектах окружающей среды

Сборник методических указаний
МУК 4.1.1434-4.1.1436а-03

Выпуск 4
Часть 3

Минздрав России

Москва 2004

1. Сборник подготовлен: Федеральным научным центром гигиены им. Ф.Ф. Эрисмана (чл.-корр. РАМН, проф. В.Н. Ракитский, проф. Т.В. Юдина); Московской сельскохозяйственной академией им. К.А. Тимирязева (проф. В.А. Калинин, к.хим.н. А.В. Довгилевич); при участии Департамента Госсанэпиднадзора Минздрава России (А.П. Веселов). Разработчики методик указаны в конце каждой из них.

2. Методические указания рекомендованы к утверждению Комиссией по госсанэпиднормированию при Минздраве России.

3. Утверждены Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации, Первым заместителем Министра здравоохранения Российской Федерации, академиком РАМН Г.Г. Онищенко 24 июня 2003 г.

4. Введены с 30 июня 2003 г.

5. Введены впервые.

УТВЕРЖДАЮ

Главный государственный санитарный

врач Российской Федерации,

Первый заместитель Министра

здравоохранения Российской Федерации

Г.Г. Онищенко

24 июня 2003 г.

Дата введения: 30 июня 2003 г.

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций Тритиконазола в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии

Методические указания

МУК 4.1.1436а-03

1. Вводная часть

Фирма-производитель: Байер КропСайенс.

Торговое название: Премис.

Название действующего вещества по ИСО: Тритиконазол.

Название действующего вещества по ИЮПАК: (1RS)-(Е)-5-[(4-хлорфенил)метилен]-2,2-диметил-1-(1Н-1,2,4-триазол-1-илметил)-циклопентан-1-ол (ИЮПАК).

Структурная формула:

Эмпирическая формула: С₁₇Н₂₀СlN₃О.

Молекулярная масса: 317,82.

Белый порошок без запаха.

Температура плавления: 139,0 - 140,5 °С.

Плотность при 20 °С: 1,324 - 1,366 кг/м³.

Давление паров при 50 °С: менее 0,1 ´ 10 гПа.

Хорошо растворим в дихлорметане, ацетоне, этилацетате, плохо - в гексане, растворимость в воде при 20 °С - 8,5 мг/л.

Стабилен в водных растворах.

Может присутствовать в воздухе рабочей зоны в виде аэрозоля.

Краткая токсикологическая характеристика. Тритиконазол относится к веществам, опасным по ингаляционной токсичности (ЛК₅₀ крысы - 1400 мг/м³), малоопасным по острой пероральной (ЛД₅₀ крысы - более 2000 мг/кг) и дермальной токсичности (ЛД₅₀ крысы - более 2000 мг/кг).

В России установлены следующие гигиенические нормативы:

ДСД - 0,005 мг/кг массы человека;

ОБУВ в воздухе рабочей зоны при применении - 1,0 мг/м³;

ОБУВ в воздухе атмосферы при применении - 0,01 мг/м³.

Область применения препарата. Тритиконазол - фунгицид контактного и системного действия, рекомендуемый для обработки семян пшеницы против многих грибов и ряда лиственных патогенов, таких как ржавчина, мучнистая роса, пятнистость, болезни всходов, колосковая головня. Расход препарата от 25 до 50 г д.в. на тонну зерна.

Зарегистрирован в России в качестве фунгицида под фирменными названиями Премис двести, кс (200 г/л), Премис, кс (25 г/л) - против головни, ржавчины, корневых гнилей, септориоза, мучнистой росы зерновых культур, с нормой расхода 0,15 - 0,25 л/т.

2. Методика измерения концентраций Тритиконазола в воздухе рабочей зоны методом газожидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1. Принцип метода

Методика основана на определении Тритиконазола с помощью газожидкостной хроматографии с детектором постоянной скорости рекомбинации. Отбор воздуха осуществляется концентрированием аэрозоля на бумажные фильтры «синяя лента».

Количественное определение проводится методом абсолютной калибровки.

2.1.2. Избирательность метода

В предлагаемых условиях метод специфичен в присутствии компонентов препаративной формы, а также пестицидов, применяемых в интенсивной технологии выращивания зерновых культур.

2.1.3. Метрологическая характеристика метода (р = 0,95)

Число параллельных определений - 10.

Предел обнаружения в хроматографируемом объеме - 0,5 нг.

Предел обнаружения в воздухе - 0,007 мг/м³ (при отборе 75 л воздуха).

Диапазон определяемых концентраций - 0,007 - 0,112 мг/м³.

Среднее значение определения - 94,4 %.

Стандартное отклонение (S) - 8,98 %.

Относительное стандартное отклонение (DS) - 2,84 %.

Доверительный интервал среднего - 6,42 %.

Суммарная погрешность измерения не превышает 13 %.

2.2. Реактивы, растворы и материалы

Тритиконазол с содержанием д.в. 99,3%

Азот, осч                                                                                              ГОСТ 9293-74

Ацетон, осч                                                                                         ГОСТ 2603-79

Бумажные фильтры «синяя лента»,

предварительно промытые ацетоном

Хромасорб W-НD с 3 % ОV-101 (0,12 - 0,16 мм)

Хроматон N-АW с 5 % SЕ-30 (0,16 - 0,20 мм),

Хемапол

2.3. Приборы, аппаратура, посуда

Газовый хроматограф «Цвет» или аналогичный, снабженный детектором постоянной скорости рекомбинации (ДПР) с пределом детектирования по линдану 4·10-14 г/см3
Колонка хроматографическая стеклянная, длиной 1 м, внутренним диаметром 2 - 3 мм
Аспирационное устройство достаточной разрешающей способности типа ЭА-1	ТУ 25-11-1414-78
Барометр-анероид М-67	ТУ 2504-1797-75
Весы аналитические ВЛА-200 или аналогичные	ГОСТ 34104-80Е
Колбы грушевидные со шлифом, вместимостью 100 мл	ГОСТ 10394-72
Колбы мерные, вместимостью 100 мл	ГОСТ 1770-74
Пипетки, вместимостью 0,1 и 1 мл	ГОСТ 20292-74
Ротационный вакуумный испаритель ИР-1М или аналогичный	ТУ 25-11-917-74
Стаканы химические, вместимостью 100 мл	ГОСТ 25336-82Е
Стеклянные палочки
Термометр лабораторный шкальный ТЛ-2, цена деления 1 °С, пределы измерения 0 - 55 °С	ГОСТ 215-73Е
Фильтродержатель
Цилиндры мерные, вместимостью 10 мл	ГОСТ 1770-74Е

2.4. Отбор проб

Отбор проб воздуха рабочей зоны осуществляют в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны».

Воздух с объемным расходом 5,0 дм³/мин аспирируют в течение 15 мин через фильтр «синяя лента». Фильтры с отобранными пробами, упакованные в полиэтиленовые пакеты, можно хранить при комнатной температуре в течение 30 дней.

2.5. Подготовка к определению

2.5.1. Подготовка и кондиционирование колонки

Готовую насадку (5 % SЕ-30 на Хроматоне N-АW) засыпают в стеклянную колонку, уплотняют под вакуумом, колонку устанавливают в термостате хроматографа, не подсоединяя к детектору, и стабилизируют в токе азота при температуре 250 °С в течение 10 - 12 ч. Затем колонку подсоединяют к детектору, устанавливают параметры хроматографирования, указанные в п. 2.7.1, и проводят тренировку колонки в течение 8 - 10 ч, вводя в испаритель газового хроматографа по 1 мкл стандартного раствора Тритиконазола с концентрацией 100 мкг/мл.

2.5.2. Приготовление стандартных растворов

Стандартный раствор Тритиконазола с содержанием 100 мкг/мл готовят растворением 0,01 г вещества в ацетоне в мерной колбе на 100 мл. Раствор хранится в холодильнике в течение 6 месяцев.

Рабочие стандартные растворы с концентрациями 0,5; 1,5; 3,0; 5,0; 8,0 мкг/мл готовят из раствора, содержащего 100 мкг/мл Тритиконазола соответствующим разбавлением ацетоном. Растворы хранятся в холодильнике в течение 3 месяцев.

2.5.3. Построение градуировочного графика

Для построения градуировочного графика на определение Тритиконазола в испаритель хроматографа вводят по 1 мкл рабочего стандартного раствора с концентрациями 0,5; 1,5; 3,0; 5,0 и 8,0 мкг/мл.

Осуществляют не менее 5 параллельных измерений. Находят среднее значение высоты хроматографического пика для каждой концентрации. Строят градуировочный график зависимости высоты хроматографического пика в мм от содержания Тритиконазола в пробе в нг.

2.6. Описание определения

Фильтр с отобранной пробой переносят в химический стакан вместимостью 100 мл, заливают 10 мл ацетона и оставляют на 4 - 5 мин. Растворитель сливают, отжимая фильтр стеклянной палочкой. Фильтр еще дважды обрабатывают новыми порциями ацетона объемом 10 мл.

Далее объединенный экстракт упаривают в грушевидных колбах на ротационном вакуумном испарителе при температуре не выше 45 °С почти досуха, оставшийся растворитель отдувают током теплого воздуха. Остаток растворяют в 1 мл ацетона и 1 мкл полученного раствора анализируют по п. 2.7.

2.7. Условия хроматографирования градуированных и анализируемых растворов

Хроматограф газовый «Цвет-570», с детектором постоянной скорости рекомбинации.

2.7.1. Неподвижная фаза - 5 % SЕ-30 на Хроматоне N-АW (0,16 - 0,20 мм)

Колонка стеклянная, длиной 1 м, внутренним диаметром 3 мм.

Рабочая шкала электрометра                             64·10 Ом.

Скорость движения ленты самописца              240 мм/ч.

Температура термостата колонки                     240 °С;

                           детектора                                       340 °С;

                       испарителя                                    390 °С.

Скорость газа-носителя (азот)                           35 мл/мин.

Объем вводимой пробы                                      1 мкл.

Абсолютное время удерживания                       1 мин 30 с.

Линейный диапазон детектирования               0,5 - 8,0 нг.

2.7.2. Альтернативная хроматографическая фаза

Неподвижная фаза - 3 % ОV-101 на Хромасорбе W-HD (0,12 - 0,16 мм).

Колонка стеклянная, длиной 1 м, внутренним диаметром 3 мм.

Рабочая шкала электрометра                             32·10¹⁰ ом.

Скорость движения ленты самописца              240 мм/ч.

Температуры термостата колонки                    235 °С;

                        детектора                                      340 °С;

                        испарителя                                   390 °С.

Скорость газа-носителя (азота)                         30 мл/мин.

Объем вводимой пробы                                      1 мкл.

Абсолютное время удерживания                       1 мин 32 с.

Линейный диапазон детектирования               0,5 - 8,0 нг.

Среднюю высоту пика вычисляют из результатов трех последовательных вводов пробы в испаритель хроматографа. Образцы, дающие пики большие, чем стандартный раствор с концентрацией 8,0 мкг/мл, разбавляют ацетоном.

2.8. Обработка результатов анализа

Содержание Тритиконазола в воздухе рассчитывают методом абсолютной калибровки по формуле:

, где

С - содержание тритиконазола в воздухе, мг/м³;

А - количество вещества, найденное по градуировочному графику в анализируемом объеме пробы, нг;

В - общий объем пробы для хроматографирования, мл;

b - объем пробы, вводимый в хроматограф, мкл;

V - объем пробы воздуха, отобранный для анализа, приведенный к стандартным условиям (давление 760 мм рт.ст., температура 20 °С), л.

, где

Т - температура воздуха при отборе пробы (на входе в аспиратор), °С;

Р - атмосферное давление при отборе пробы, мм рт.ст.;

u - расход воздуха при отборе пробы, дм³/мин;

t - длительность отбора пробы, мин.

3. Требования техники безопасности

При выполнении измерений концентраций Тритиконазола в воздухе необходимо соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях в соответствии с «Правилами устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемиологического режима и личной гигиены при работе в лечебных и санитарно-эпидемиологических учреждениях системы МЗ СССР» (№ 2455-81 от 20.10.81), а также требования, изложенные в документации на прибор.

4. Разработчики

Калинин В.А., проф., к.с-х.н.; Довгилевич Е.В., к.биол.н.; Калинина Т.С., к.с-х.н.; Довгилевич А.В., к.хим.н.

Московская сельскохозяйственная академия им. К.А. Тимирязева.

Учебно-научный консультационный центр «Агроэкология пестицидов и агрохимикатов». 127550, Москва, Тимирязевская ул., д. 53/1. Телефон: (095) 976-37-68, факс: (095) 976-43-26.

СОДЕРЖАНИЕ