4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций фенигидина(2,6-диметил-3,5 диметоксикарбонил-4-(0-нитрофенил)-1,4-дигидропиридин) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны

МУК 4.1.0.398-96

Минздрав России

Москва · 1999

1. Методические указания разработаны с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ их предельно допустимым концентрациям (ПДК) и ориентировочно безопасным уровням воздействия (ОБУВ) - санитарно-гигиеническим нормативам и являются обязательными при осуществлении санитарного контроля.

2. Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (выпуск 32) утверждены и. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора России - заместителем Главного государственного санитарного врача Российской Федерации 8 июня 1996 г.

3. Введены впервые.

4. Включенные в данный выпуск методики контроля разработаны и подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТа 12.1.005-88 ССБТ «Воздух рабочей зоны. Общие санитарно-гигиенические требования», ГОСТа 12.1.016-79 ССБТ «Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ», ГОСТа Р 1.5-92 п. 7.3, ГОСТа 8.101-90 «Государственная система обеспечения единства измерений. Методики выполнения измерений». Методические указания одобрены комиссией по государственному санитарно-эпидемиологическому нормированию Госкомсанэпиднадзора России и Проблемной комиссией «Научные основы гигиены труда и профпатологии».

Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны (выпуск 32) предназначены для центров Госсанэпиднадзора, санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также заинтересованных министерств и ведомств.

Ответственный исполнитель: Г.А. Дьякова

Исполнители: Г.А. Дьякова, Л.Г. Макеева, Е.М. Малинина, С.М. Попова, Н.С. Горячев, М.И. Аржанова, Т.В. Рязанцева, Е.Н. Грицун.

УТВЕРЖДЕНО

И. о. Председателя Госкомсанэпиднадзора

России - заместителем Главного

государственного санитарного врача

Российской Федерации

Г.Г. Онищенко

8 июня 1996 г.

МУК 4.1.0.398-96

Дата введения: с момента утверждения

4.1. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. ХИМИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Измерение концентраций фенигидина(2,6-диметил-3,5 диметоксикарбонил-4-(0-нитрофенил)-1,4-дигидропиридин) методом высокоэффективной жидкостной хроматографии в воздухе рабочей зоны

                                               М. м. 346,34

2,6-Диметил-3,5-диметоксикарбонил-4-(0-нитрофенил)-1,4-дигидропиридин (коринфан, фенигидин) - кристаллическое вещество желтого цвета. Хорошо растворим в ацетоне, хлороформе. Плохо растворим в спирте. Не растворятся в воде, эфире.

В воздухе находится в виде аэрозоля.

Обладает общетоксическим действием.

ОБУВ в воздухе - 0,5 мг/м³.

Характеристика метода

Метод основан на использовании высокоэффективной жидкостной хроматографии с применением УФ-детектора.

Отбор проб производится с концентрированием на фильтр.

Нижний предел измерения фенигидина в хроматографируемом объеме (20 мкл) - 0,04 мкг.

Нижний предел измерения фенигидина в воздухе - 0,25 мг/м³ (при отборе 80 л воздуха).

Диапазон измеряемых концентраций в воздухе от 0,25 до 2,5 мг/м³.

Измерению не мешают: пары органических соединений, другие производные ряда дигидропиридинов.

Суммарная погрешность измерения не превышает ±15 %.

Время выполнения измерения, включая отбор пробы - около 60 мин.

Приборы, аппаратура, посуда

Микроколоночный жидкостный хроматограф

«Милихром» или другие модели с УФ-детектором

Хроматографическая колонка длиной 150 мм,

внутренним диаметром 3 мм, заполненная

сорбентом «Силасорб LC 18» с размером зерен

6 мкм (ЧСФР)

Аспирационное устройство

Фильтродержатель

Колбы мерные, вместимостью 50 и 100 мл                                         ГОСТ 1770-74

Пипетки, вместимостью 1, 5, 10 мл                                                     ГОСТ 20292-74

Пробирки с пришлифованными пробками                                         ГОСТ 10515-75

Ротационный испаритель

Колбы грушевидные для вакуумной перегонки,

вместимостью 50 мл

Реактивы, растворы, материалы

Фенигидин

Ацетонитрил, ОП-3, ос. ч.                                                                    ТУ 6-09-5449-89

Уксусная кислота, ледяная, х. ч.                                                           ГОСТ 61-75

Аммиак водный, конц. раствор

Спирт этиловый                                                                                     ГОСТ 5963-67

Элюент: ацетонитрил - 0,1 М аммоний-ацетатный

буфер рН 5,5 (60 : 40)

Стандартный раствор фенигидина с концентрацией 200 мкг/мл готовят растворением 0,02 г фенигидина в элюенте в мерной колбе, вместимостью 100 мл.

Градуированные растворы с концентрациями фенигидина от 0,002 до 0,020 мг/мл готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора элюентом. Растворы устойчивы при хранении в холодильнике в течение 3-х суток.

Фильтры АФА-ВП-20                                                                           ТУ 95-743-80

Отбор проб воздуха

Воздух с объемным расходом 5 л/мин аспирируют через фильтр АФА-ВП-20. Для определения 0,5 ОБУВ достаточно отобрать 80 л воздуха. Пробы можно хранить в закрытых сосудах в холодильнике 3-е суток.

Подготовка к измерению

Жидкостный хроматограф готовят к работе согласно приложенной к нему инструкции. Для работы используют хроматографическую колонку промышленного изготовления.

Для построения градуировочного графика из каждого градуировочного раствора в колонку жидкостного хроматографа вводят по 20 мкл, что будет соответствовать от 0,04 до 0,4 мкг фенигидина.

Условия хроматографирования градуировочных смесей и анализируемых проб:

Температура термостата колонки                                                         20 °С

Скорость подачи элюента (ацетонитрил - 0,1 М

аммоний-ацетатный буфер рН 5,5 (60 : 40))                                        1 мл/мин

Длина волны УФ-детектора                                                                  254 нм

Скорость движения диаграммной ленты                                            5 мм/мин

Чувствительность детектора                                                                 0,04

Диапазон измерения самописца                                                           1 мВ

Максимальный объем вводимой пробы                                              20 мкл

Время удерживания                                                                               5 мин 30 с

Элюирующий объем                                                                              5,52 мл

Эффективность колонки                                                                       3000 тт

На полученной хроматограмме измеряют площади пиков и строят градуировочную кривую, выражающую зависимость площади пиков от содержания фенигидина в хроматографируемом объеме пробы (мкг). Построение градуировочного графика необходимо проводить не менее чем по 6 точкам, выполняя по 5 параллельных измерений для каждого инжектируемого объема. Проверку градуировочного графика следует проводить при изменении условий анализа, но не реже 1 раза в месяц.

Проведение измерения

Фильтр с отобранной пробой помещают в пробирку с пришлифованной пробкой, добавляют 10 мл этанола и оставляют на 20 - 25 мин при комнатной температуре, периодически перемешивая стеклянной палочкой. Степень десорбции с фильтра составляет 97 - 98 %. Раствор переносят в колбу для вакуумной перегонки и упаривают этанольный раствор досуха при 6 - 8 мм рт. ст. и температуре не выше 40 °С. Сухой остаток растворяют в 10 мл элюента.

Хроматографирование анализируемого раствора проводят в тех же условиях по отношению к тому же элюенту, что и при построении градуировочного графика. Количественное определение фенигидина в хроматографируемом объеме проводят по предварительно построенному графику.

Расчет концентрации

Концентрацию фенигидина (С) в воздухе (мг/м³) вычисляют по формуле:

а - содержание фенигидина в хроматографируемом объеме пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;

б - объем пробы, взятой на хроматографирование, мл;

в - общий объем анализируемого раствора, мл;

V - объем воздуха, отобранного для анализа и приведенного к стандартным условиям, л (см. приложение 1).

Методические указания разработаны Латвийской медицинской академией и НИО «Экотокс», г. Москва.

Приложение 1

Приведение объема воздуха к стандартным условиям (температура 20 °С и давление 760 мм рт. ст.) проводят по формуле:

V_t - объем воздуха, отобранный для анализа, л;

Р - барометрическое давление, кПа (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);

t - температура воздуха в месте отбора пробы, °С.

Для удобства расчета V₂₀ следует пользоваться таблицей коэффициентов (приложение 2). Для приведения воздуха к стандартным условиям надо умножить V_t на соответствующий коэффициент.

Приложение 2

Коэффициенты для приведения объема воздуха к стандартным условиям

Приложение 3

Вещества, определяемые по ранее утвержденным методическим указаниям по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны

Приложение 4

Рис. 1

Ловушка-концентратор. Общий вид

Рис. 2

Ловушка-концентратор