Утвержден Постоянной Комиссией по сотрудничеству
в области стандартизации

Прага, июль 1983 г.

1. МАКРОМЕТОД

1.1. Сущность метода

Метод заключается в разрушении пробы концентрированной серной кислотой и сернокислым калием в присутствии катализатора - сернокислой меди - последовательном подщелачивании, перегонке, титровании освободившегося аммиака и последующем пересчете результатов на белок.

1.2. Общие положения

1.2.1. Для проведения испытаний применяют реактивы квалификации «чистый для анализа» (ч.д.а.) и дистиллированную воду или воду эквивалентной чистоты.

1.2.2. Испытания проводят в помещениях, свободных от паров аммиака.

1.3. Пробы

1.3.1. Техника отбора проб - по СТ СЭВ 1745-79.

1.3.2. Подготовка проб - по СТ СЭВ 823-77.

1.4. Аппаратура

Для проведения испытания применяют:

1) весы аналитические с наибольшим пределом взвешивания 200 g и допускаемой погрешностью взвешивания не более 0,0002 g;

2) колбу Кьельдаля вместимостью 500 cm³;

3) мерные цилиндры вместимостью 50 и 100 cm³;

4) аппаратуру для перегонки по Парнас-Вагнеру, колбу вместимостью 500 cm³ или другую аналогичную аппаратуру;

5) колбу Эрленмейера вместимостью 200 cm³;

6) бюретку вместимостью 50 cm³ и ценой деления 0,05 cm³ без времени ожидания;

7) стакан химический вместимостью 50 cm³;

8) шпатель;

9) бутылку для воды, промывалку;

10) термометры с диапазонам измерения от 0 до 100 °С с ценой деления шкалы 1 °С;

11) аппаратуру для сжигания.

1.5. Реактивы и материалы

Для проведения испытания применяют:

1) кислоту серную (H₂SO₄) концентрированную безазотистую ρ20 = 1840 kg/m³.

2) кислоту серную, раствор с (1/2H₂SO₄) = 0,1 mol/dm³ или кислоту соляную, раствор с (HCl) =0,1 mol/dm³;

3) медь сернокислую пятиводную (CuSO₄ · 5H₂O);

4) калий сернокислый безводный (K₂SO₄);

5) кислоту борную (Н₃ВО₃), раствор с массовой концентрацией 40 g/dm³;

6) гидроокись натрия (NaOH) безазотистый, раствор с массовой концентрацией 330 g/dm³ (33 %);

7) смешанный индикатор Таширо готовят растворением 2 g метилового красного (C₁₅H₁₄O₂N₃) и 1 g метиленового голубого (C₁₆H₁₈N₃ClS) в 1000 cm³ этилового спирта (95 %). Раствор хранят в склянках из темного стекла в холодном темном месте. Допускается применять и другие индикаторы аналогичного действия;

8) материал, облегчающий кипение, обезжиренный, непористый, недробящийся при употреблении: стеклянные шарики, кусочки карбида кремния. Применение материала необязательно;

9) сахарозу (С₁₂Н₂₂О₁₁).

1.6. Подготовка к испытанию

1.6.1. Отобранную пробу нагревают до температуры (20 ± 2) °С.

1.6.2. Проводят согласно п. 1.7 контрольный опыт, применяя вместо сгущенного молока с сахаром 1,5 - 2,0 cm³ дистиллированной воды или воды аналогичного качества или 1,5 - 2,0 g сахарозы.

1.7. Проведение испытания

1.7.1. 1,5 - 2,0 g сгущенного молока с сахаром отвешивают в колбу Кьельдаля и прибавляют 20 cm³ концентрированной серной кислоты. Добавляют 10 g сернокислого калия и 0,05 g сернокислой меди, смесь нагревают под вытяжкой сначала над малым пламенем до удаления основного количества воды, затем при температуре (360 ± 20) °С до тех пор, пока содержимое колбы станет прозрачным и бесцветным или слабо зеленоватым.

1.7.2. Содержимое колбы охлаждают до температуры (20 ± 2) °С, осторожно добавляют 50 cm³ воды, перемешивают и количественно переносят в колбу для перегонки при трехкратном дополнительном промывании порциями воды по 30 cm³. Затем проводят подщелачивание 80 cm³ раствора гидроокиси натрия. Образовавшийся аммиак отгоняют в потоке водяного пара при хорошем охлаждении.

В качестве приемника применяют колбу Эрленмейера, в которую наливают 50 cm³ раствора борной кислоты и 2 - 3 капли индикатора Таширо и помещают колбу для перегонки под холодильник установки таким образом, чтобы нижний конец холодильника был полностью погружен в жидкость. Перегонка считается законченной, если в течение 30 min содержимое колбы Эрленмейера составит 100 cm³. За несколько минут до конца перегонки колбу ставят ниже и конец охладительной трубки ополаскивают дистиллированной водой. Жидкость в колбе титруют раствором серной или соляной кислоты до изменения окраски в фиолетовую.

Проводят два параллельных определения.

1.8. Обработка результатов

1.8.1. Массовую долю азота (Х₁) в процентах вычисляют по формуле

                                                        (1)

где V - объем серной кислоты c(1/2H₂SO₄) = 0,1 mol/dm³ или соляной кислоты с(HCl) = 0,1 mol/dm³, израсходованный на титрование пробы, cm³;

V₁ - объем серной кислоты c(1/2H₂SO₄) =0,1 mol/dm³ или соляной кислоты с(HCl) = 0,1 mol/dm³, израсходованный на титрование контрольной пробы, cm³;

F - коэффициент серной кислоты c(1/2H₂SO₄) =0,1 mol/dm³ или соляной кислоты, с(HCl) = 0,1 mol/dm³, определенный до четвертого десятичного знака, 1 cm³ серной кислоты c(1/2H₂SO₄) = 0,l mol/dm³ или соляной кислоты с(HCl) = 0,1 mol/dm³, соответствует 1,4 mg азота;

m - масса навески, g.

1.8.2. Массовую долю белка (Х₂) в процентах вычисляют по формуле

Х₂ = Х₁ · 6,38,                                                                       (2)

где X₁ - массовая доля азота, вычисленная по формуле (1), %;

6,38 - коэффициент пересчета.

1.8.3. За результат испытания принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает 0,06 % белка. Разница в результатах определений массовой доли белка, проведенных в 2-х лабораториях, не должна превышать 0,12 % белка.

1.9. Настоящий макрометод является арбитражным.

2. ПОЛУМИКРОМЕТОД

2.1. Сущность метода

Метод заключается в разрушении пробы раствором селена в серной кислоте, последовательном подщелачивании, перегонке, титровании освободившегося аммиака и последующем пересчете результатов на белок.

2.2. Общие положения

Общие положения по п. 1.2.

2.3. Пробы

2.3.1. Техника отбора проб - по СТ СЭВ 1745-79.

2.3.2. Подготовка проб - по СТ СЭВ 823-77.

2.4. Аппаратура

Для проведения испытания применяют:

1) весы аналитические с наибольшим пределом взвешивания 200 g и допускаемой погрешностью взвешивания не более ±0,0002 g;

2) пипетку или дозировочный шприц вместимостью 1 cm³;

3) бюретку вместимостью 25 cm³ и ценой деления 0,05 cm³ без времени ожидания;

4) полумикроаппаратуру Кьельдаля, состоящую из:

- алюминиевого блока 400×100×90 mm с 18 отверстиями диаметром 33 mm, глубиной 85 до 90 mm, нагреваемого газом или электроэнергией (черт. 1 и 2);

Трехступенчатый включатель

900 W

J 200 W

J 800 W

Черт. 1

Черт. 2

- колб разложения и перегонки по Конраду цилиндрических, длиной 195 mm, диаметром 32 mm, с нормальным шлифом 19, вместимостью 100 cm³, с дном, выполненным в виде конуса под углом от 108 до 128° (черт. 3);

5) аппаратуру для перегонки;

6) бюретку предохранительную или экспресс-бюретку вместимостью не менее 4 cm³;

7) воронку;

8) колбу Эрленмейера вместимостью 100 cm³;

9) цилиндры мерные вместимостью 1000 cm³ и 100 cm³;

10) термометры с диапазоном измерения от 0 до 400 °С, с ценой деления шкалы 1 °С и от 0 до 100 °С, с ценой деления шкалы 1 °С;

11) стакан химический вместимостью 400 cm³;

12) шпатель;

13) бутылку для воды, промывалку;

14) реле часовое.

2.5. Реактивы и материалы

Для проведения испытания применяют:

1) раствор селена в серной кислоте готовят следующим образом: 5 g селена растворяют в 1000 cm³ концентрированной серной кислоты плотностью ρ20 = 1840 kg/m³ и нагревают до получения бесцветной жидкости;

2) кислоту серную c(1/2H₂SO₄) =0,05 mol/dm³;

3) натрия гидроокись, (NaOH) раствор с массовой концентрацией 330 g/dm³ (33 %);

4) кислоту борную, (Н₃ВО₃) раствор с массовой концентрацией 20 g/dm³ (2 %);

5) индикатор Таширо - смесь из 100 cm³ метилового красного раствора = 0,3 g/dm³ (в 70 %-ном спирте) и 15 cm³ раствора метиленового голубого (в воде) = 1 g/dm³. Раствор хранят в склянках из темного стекла в холодном темном месте;

6) тимолфталеин 1 g/dm³, спиртовой раствор, по СТ СЭВ 809-77;

7) сахарозу (С₁₂Н₂₂О₁₁).

2.6. Подготовка к испытанию

2.6.1. Отобранную пробу нагревают до температуры (20 ± 2) °С.

2.6.2. Проводят контрольный опыт, применяя вместо сгущенного молока с сахаром 0,5 cm³ дистиллированной воды или 0,5 g сахарозы.

2.7. Проведение испытания

0,50 g сгущенного молока с сахаром взвешивают в колбе разложения и прибавляют 4 cm³ раствор селена в серной кислоте. При помощи насыпной воронки и шпателя добавляют от 0,5 до 1 g сернокислого калия и взбалтывают. Колбы разложения нагревают в алюминиевом нагревательном блоке до температуры (360 ± 10) °С и при многократном взбалтывании выдерживают при этой температуре до тех пор, пока содержимое станет прозрачным и бесцветным. После охлаждения содержимое колбы разводят эквивалентным количеством дистиллированной воды, добавляют 2 капли раствора тимолфталеина и подключают колбу разложения к аппарату для перегонки.

В качестве приемника применяют колбу Эрленмейера, в которую наливают около 20 cm³ раствора борной кислоты и несколько капель индикатора Таширо. Колбу помещают таким образом, чтобы нижний конец холодильника был полностью погружен в жидкость.

К раствору разложения добавляют раствор гидроокиси натрия до перехода окраски раствора в синюю и дистиллируют в течение 3 min в потоке водяного пара. Через 2 min после перехода фиолетовой окраски раствора борной кислоты в зеленую приемник снимают, дистиллируют еще в течение 60 s и титруют 0,05 mol/dm³ раствором серной кислоты до перехода окраски в фиолетовую.

1 - подвесной крючок; 2 - нормальный шлиф; 3 - матовая площадь; 4 - горло; 5 - дно

Черт. 3

Проводят два параллельных определения.

2.8. Обработка результатов

2.8.1. Массовую долю азота (Х₃) в процентах вычисляют по формуле

                                                      (3)

где V₂ - объем серной кислоты c(1/2H₂SO₄) = 0,05 mol/dm³, израсходованный на титрование исследуемой пробы, cm³;

V₃ - объем серной кислоты c(1/2H₂SO₄) = 0,05 mol/dm³, израсходованный на титрование контрольной пробы, cm³,

F - коэффициент серной кислоты c(1/2H₂SO₄) = 0,05 mol/dm³, определенный до четвертого знака после запятой; 1 cm³ серной кислоты c(1/2H₂SO₄) =0,05 mol/dm³ соответствует 0,7 mg азота;

m - масса навески пробы в g.

2.8.2. Массовую долю белка (Х₄) в процентах вычисляют по формуле

Х₄ = Х₃ · 6,38.                                                                       (4)

где Х₃ - массовая доля азота, вычисленная по формуле (3), %;

6,38 - коэффициент пересчета.

2.8.3. За результат испытания принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает 0,04 % белка.

Разница в результатах определений массовой доли белка, проведенных в 2-х лабораториях, не должна превышать 0,08 % белка.

 

ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ

1. Автор - делегация ГДР в Постоянной Комиссии по сотрудничеству в области пищевой промышленности.

2. Тема - 20.400.19-81.

3. Стандарт СЭВ утвержден на 53-м заседании ПКС.

4. Сроки начала применения стандарта СЭВ:

5. Срок первой проверки - 1990 г., периодичность проверки - 5 лет.

 

СОДЕРЖАНИЕ